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技術支持

深入了解下內酰胺酶檢測的具體原理
發布時間:2021-03-16   點擊次數:1108次
        內酰胺酶檢測具有高通量、快速、準確的特點,由于采用分體拼裝設置,攜帶方便,檢測時可根據檢測項目可靈活調整檢測孔的數量,測試結果直觀準確,從而大大的提高了工作效率,同時也節約了檢測成本。
  內酰胺酶檢測的實驗原理:
  酸測量法:青霉素被β-內酶胺酶水解后成青霉素酸,pH值下降到6.8以下,用酚紅指示劑,由紅(紫)色 (原液:枸櫞酸緩沖液pH8.5) →黃色(pH6.8以下);淀粉-碘測定法:β內酰胺酶破壞β內酰胺環,碘與被打開β內酰胺環結合,使藍色的淀粉-碘復合物轉變成無色。β-內酰胺酶是多種不同類型以β-內酰胺類抗菌藥物為底物的降解酶,通過水解β-內酰胺環造成β-內酰胺類藥物失去活性,將待測菌與頭孢硝噻吩作用一定時間后,如待測菌產生青霉素酶,則可水解頭孢硝噻吩的β-內酰胺環,顏色由黃色變為紅色。
  內酰胺酶檢測的臨床意義:
  1.細菌產生β-內酰胺酶可使易感抗生素水解而滅活。
  2.對革蘭陰性菌產生的β-內酰胺酶穩定的廣譜青霉素和二、三代頭孢菌素,其耐藥機制不是由于抗生素被β-內酰胺酶水解,而是由于抗生素與大量的β-內酰胺酶結合,使其停留于胞膜外間隙中,不能進入靶位發生抗菌作用。
  3.青霉素結合蛋白(PBPs)靶蛋白與抗生素親和力降低,PBPs增多或產生新的PBPs均可使抗菌藥物失去抗菌作用。
  4.細菌的細胞壁或外膜的通透性改變,使抗生素不能或很少進入細菌體內到達作用靶位,革蘭陰性菌的外膜是限制β-內酰胺類抗生素透入菌體的一道屏障。銅綠假單胞菌對β-內酰胺類抗生素耐藥性是由于外膜非特異性孔道蛋白缺陷所致的。

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